培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑
英文名稱:K-252B
產(chǎn)品規(guī)格:1mg
發(fā)貨周期:1~3天
CAS號:99570-78-2
MDL號:MFCD00132117
EINECS號:999-999-2
分子量:453.45
儲存條件:冷凍(-20℃)
我們科研實驗室: 實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,*將組織剪成1mm3左右大?。?
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞*;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,*在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
3-炳基十四基二甜菜堿 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR Myristyl sulfobetaine 桿菌屬 Lactobacillus sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
莫地平雜質(zhì)Ⅰ 訂購|咨詢 規(guī)格: 50mg 10號染色體開放閱讀框93抗體 TRACP ELISA Kit 人抗酒石性酶(TRACP)ELISA試劑盒
4'-酰并-18-冠-6-(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether FRhK-4(恒河猴胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
重樓皂苷 VⅡ 英文名稱:Paris polyphylla saponin V II 保存:-20℃ 規(guī)格:10mg 前列腺素E2抗體
敵草隆(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5% Diuron 粘蛋白20(MUC20)重組蛋白英文名稱:Recombinant Mucin 20 (MUC20)
蒿 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg ATP6V1B2蛋白抗體 SHH ELISA Kit 音猬因子(SHH)ELISA試劑盒
嗎氯貝胺 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) Moclobemide 胞外5'-核苷酶(NT5E)重組蛋白英文名稱:Recombinant 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E)
9-氧基喜樹堿 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 人毛細血管擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒人96T6.25-400 nmol/L小鼠碳酐酶1(CA-1)ELISA試劑盒,英文名:CA-1 ELISA Kit
刺玫果 英文名稱:Rosa davurica 保存:-20℃ 規(guī)格:1g DNA修復蛋白NBS1抗體
菝葜皂苷元;Sarsasapogenin 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg ELISA Kit for Human Platelet-derived growth factor D大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒,英文名:EGF ELISA Kit
柚皮苷二查爾 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Naringin dihydrochalcone 人非小細胞肺細胞英文名稱:NCI-H1299
1,6,20,25-四氮雜[6.1.6.1]對環(huán)芳(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 1,6,20,25-Tetraaza[6.1.6.1]paracyclophane QBC-939, 人膽管細胞
蘇丹紅G/溶劑紅1/油紅113 質(zhì)量規(guī)格:BS Sudan red G/Solvent Red 1 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)
K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格: 0.1mlCECR6 貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 規(guī)格: 0.2ml 萊苞迪甙C(標準品) Rebaudioside C
S100A4 S100A4抗體 規(guī)格: 0.1ml 鳶尾多糖 Roof Iris Rhizome polysaccharose
TBX2/T-box2 栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑基因) 規(guī)格: 0.2ml 半胱胺鹽鹽 Cysteamine Hydrochloride
Mouse Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml 3-基喃 3-Methylfuran (stabilized with HQ)
L-Selectin/CD62L L選擇素抗體 規(guī)格: 0.1ml 3-溴基-7-氧基-1,4-并惡嗪-2-(>98.0%(T)) 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one
TMPRSS4 膜型絲氨蛋白酶2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-dog IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1ml 酰胺 Acetazolamide
Vesicle docking protein p115 囊泡對接蛋白p115抗體 0.2ml 1-酚 1-Naphthol
FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X 母細胞瘤基因X染色體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 4-基-6,7-亞基二氧代香豆素(>99.0 %(GC)) 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin
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培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑
英文名稱:K-252B
產(chǎn)品規(guī)格:1mg
發(fā)貨周期:1~3天
CAS號:99570-78-2
MDL號:MFCD00132117
EINECS號:999-999-2
分子量:453.45
儲存條件:冷凍(-20℃)
我們科研實驗室:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,*將組織剪成1mm3左右大?。?
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞*;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,*在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
3-炳基十四基二甜菜堿 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR Myristyl sulfobetaine 桿菌屬 Lactobacillus sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
莫地平雜質(zhì)Ⅰ 訂購|咨詢 規(guī)格: 50mg 10號染色體開放閱讀框93抗體 TRACP ELISA Kit 人抗酒石性酶(TRACP)ELISA試劑盒
4'-酰并-18-冠-6-(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether FRhK-4(恒河猴胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
重樓皂苷 VⅡ 英文名稱:Paris polyphylla saponin V II 保存:-20℃ 規(guī)格:10mg 前列腺素E2抗體
敵草隆(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5% Diuron 粘蛋白20(MUC20)重組蛋白英文名稱:Recombinant Mucin 20 (MUC20)
蒿 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg ATP6V1B2蛋白抗體 SHH ELISA Kit 音猬因子(SHH)ELISA試劑盒
嗎氯貝胺 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) Moclobemide 胞外5'-核苷酶(NT5E)重組蛋白英文名稱:Recombinant 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E)
9-氧基喜樹堿 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 人毛細血管擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒人96T6.25-400 nmol/L小鼠碳酐酶1(CA-1)ELISA試劑盒,英文名:CA-1 ELISA Kit
刺玫果 英文名稱:Rosa davurica 保存:-20℃ 規(guī)格:1g DNA修復蛋白NBS1抗體
菝葜皂苷元;Sarsasapogenin 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg ELISA Kit for Human Platelet-derived growth factor D大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒,英文名:EGF ELISA Kit
柚皮苷二查爾 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Naringin dihydrochalcone 人非小細胞肺細胞英文名稱:NCI-H1299
1,6,20,25-四氮雜[6.1.6.1]對環(huán)芳(>98.0%(HPLC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 1,6,20,25-Tetraaza[6.1.6.1]paracyclophane QBC-939, 人膽管細胞
蘇丹紅G/溶劑紅1/油紅113 質(zhì)量規(guī)格:BS Sudan red G/Solvent Red 1 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)
K-252B(蛋白激酶仰制劑) ,生化試劑Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格: 0.1mlCECR6 貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 規(guī)格: 0.2ml 萊苞迪甙C(標準品) Rebaudioside C
S100A4 S100A4抗體 規(guī)格: 0.1ml 鳶尾多糖 Roof Iris Rhizome polysaccharose
TBX2/T-box2 栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑基因) 規(guī)格: 0.2ml 半胱胺鹽鹽 Cysteamine Hydrochloride
Mouse Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml 3-基喃 3-Methylfuran (stabilized with HQ)
L-Selectin/CD62L L選擇素抗體 規(guī)格: 0.1ml 3-溴基-7-氧基-1,4-并惡嗪-2-(>98.0%(T)) 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one
TMPRSS4 膜型絲氨蛋白酶2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-dog IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1ml 酰胺 Acetazolamide
Vesicle docking protein p115 囊泡對接蛋白p115抗體 0.2ml 1-酚 1-Naphthol
FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X 母細胞瘤基因X染色體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 4-基-6,7-亞基二氧代香豆素(>99.0 %(GC)) 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin