操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及*濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供*價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

中文名稱：甘油三脂(TG)檢測(cè)試劑盒(單試劑GPO-微板法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：96T

發(fā)貨周期：1～3天

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

Integrin alpha 2/CD49b  整合素α2抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-INPPL1(Ser576)  肌醇聚磷酸鹽磷酸樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Laminin Beta 2/Laminin S  層粘連蛋白β2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

AGT  管緊張素原抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA KitELISA.96T/48T大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA Kit ELISA. 96T/48T

CDK2  周期素依賴性激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

MPP9/MPHOSPH9  有絲分裂細(xì)胞周期蛋白MPP9抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-GSK3 Beta (Tyr216)  磷酸化葡萄糖合成激3β抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit anti-Pig IgG whole serum  兔抗豬IgG抗清 規(guī)格: 1ml

Phospho-NFKB p65(Ser468)  磷酸化細(xì)胞核因子NF-κB p65抗體 規(guī)格: 0.1ml

甘油三脂(TG)檢測(cè)試劑盒(單試劑GPO-微板法)Encephalitozoon spp.腦胞內(nèi)原蟲屬通用·染料法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Nucleophosmin  核仁磷酸蛋白抗體 0.2ml

腰果源性成分PCR試劑盒 種源性檢測(cè)/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

Theileria spp.泰勒屬原蟲通用LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CDK4  周期素依賴性激4抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-FXYD1 (Ser83)  磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體 規(guī)格: 0.1ml

Red Clover Mottle Virus(RCMV)紅三葉草斑點(diǎn)病毒PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周UTS2D  尾加壓素2相關(guān)肽抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SGK1 (Thr256)  磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cortex cinnamomi肉桂PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周IL-33  白介素33抗體 規(guī)格: 0.1mlIL-15  白介素15抗體 規(guī)格: 0.1ml

Avian Reticuloendotheliosis Virus(REV)禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周phospho-EGFR (Ser1070)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlCKAP4  細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Pneumocystis carinii卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周human C3  補(bǔ)體C3抗體 規(guī)格: 0.1mlCD38  CD38抗體 規(guī)格: 0.1ml

Pericarpium citri reticulatae陳皮探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周IQCA1  IQCA1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlGLUT3  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Grass carp reovirus(GCRV)草魚呼腸孤病毒2型RT-LAMP試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Phospho-NDRG1 (Thr346)  磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 規(guī)格: 0.1mlZO-1  胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體（閉鎖小帶蛋白1） 規(guī)格: 0.1ml

Giardia intestinalis腸賈第蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）/定做種屬檢測(cè)試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周COBLL1  Cordon bleu蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MEK1/2(Ser218/222)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml