核酸檢測(cè)試劑盒叫熒光PCR探針?lè)ā?

試劑盒里分好幾部分，*重要的是PCR反應(yīng)體系：DNA聚合酶，鎂離子，引物（新冠測(cè)2個(gè)基因和1個(gè)內(nèi)標(biāo)需要3對(duì)引物），探針（也要3對(duì)探針，發(fā)出三種波長(zhǎng)的熒光），逆轉(zhuǎn)錄酶，dNTP（ATUCG會(huì)用部分U代替T），還有用于抗干擾的UDG酶（正常的DNA只有ATCG，PCR擴(kuò)增出來(lái)的DNA會(huì)有AT（會(huì)用部分U代替T）CG，這樣擴(kuò)增出來(lái)的DNA鏈中有U，UDG酶能切斷含U的DNA鏈，所以擴(kuò)增DNA在空氣中形成的氣溶膠，不會(huì)影響其他樣本）、RNA酶抑制劑（空氣中液體里全都是RNA酶，會(huì)降解病毒的RNA）、Taq酶的抗體（Hot start，常溫下能抑制Taq酶的活性，PCR擴(kuò)增時(shí)高溫讓其失活，Taq酶就在高溫時(shí)恢復(fù)活性開(kāi)始擴(kuò)增了）。

還有陰陽(yáng)性對(duì)照，陰性為水，陽(yáng)性通常的合成的DNA，新冠的N基因和ORFlab基因和內(nèi)標(biāo)基因。

內(nèi)標(biāo)的作用通常為人的基因，所有的樣本結(jié)果內(nèi)參基因有擴(kuò)增曲線，否則無(wú)效。

反正流程：核酸提取，逆轉(zhuǎn)錄，cDNA高溫95℃變性（同時(shí)Taq酶的抗體失活），剩下變性到退火延伸很多次循環(huán)，*就得到結(jié)果了。熒光PCR儀的作用在擴(kuò)增的同時(shí)能夠監(jiān)測(cè)探針的發(fā)光，得知擴(kuò)增后DNA的量。