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本試劑盒用于定性檢測人血清/血漿中的狂犬病毒(RABIES VIRUS)IgM抗體,對因動物咬傷而致感染了狂犬病毒的診斷、流行病學(xué)調(diào)研和疫苗監(jiān)測有重要意義。
適應(yīng)范圍:
動物咬傷致狂犬病毒感染的診斷和監(jiān)測。
操作步驟:
將試劑盒平衡至室溫后取出反應(yīng)板拆封。
樣本稀釋:用標(biāo)本稀釋液以1∶101(5ul-500ul)稀釋標(biāo)本。吸取已稀釋待檢標(biāo)本100ul于反應(yīng)孔中,設(shè)陰、陽性對照(各100ul/孔),設(shè)空白對照(加100ul標(biāo)本稀釋液)一孔,輕拍混勻,37℃溫育30分鐘,用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干。
加酶結(jié)合物:每孔2滴,混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。
顯色:每孔加顯色劑A、B各一滴,輕拍混勻(或震蕩器混勻)后置37℃10分鐘。
注意事項(xiàng):
微孔板須密封防潮,從冷藏環(huán)境中取出時,應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用,余者封存置2-8℃。
滴加試劑前應(yīng)將液體翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻,滴加時保持瓶身垂直。
洗滌時每孔均須加滿,防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。
試劑置2-8℃存放,不能凍結(jié),有效期10個月。
避免用溶血、混濁或脂血標(biāo)本。
*用新鮮標(biāo)本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周(樣本應(yīng)避光)。
結(jié)果判斷:
目測:在白色背景下觀察各孔顯色情況,藍(lán)色者為陽性,無色者為陰性。
酶標(biāo)儀測定:每孔加終止液一滴,混勻后在450nm下測定各孔O.D值。
P/N=標(biāo)本O.D值/ 陰性對照O.D值。
P/N≥2.1為陽性;
1.5≤P/N<2.1為可疑標(biāo)本; P/N<1.5為陰性。
陰性對照(NC)小于0.10時以0.10計(jì), 大于0.1小于0.21時以實(shí)際O.D值計(jì)算;若大于0.21時,實(shí)驗(yàn)可能出現(xiàn)了較大誤差,需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
陽性對照(PC)值通?!?.4,實(shí)驗(yàn)成立,否則需重做。
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